简单介绍一下，核酸浓度测量的230、260、280

那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于核酸浓度测量的230、260、280：

在核酸、蛋白浓度检测过程中，230nm、260nm、280nm这几个数值经常会出现，那这几个数值代表什么？他们之间的*优关系又是什么呢？

数值的意义：

230nm：碳水化合物*高吸收峰的吸收波长，与A260的比值可进行核酸样品纯度评估。A230产生负值可能是由于在低核酸浓度的样液中存在一些干扰成分。

260nm：核酸*高吸收峰的吸收波长，其吸收紫外光的性质是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的，所以嘌呤和嘧啶以及一切含有它们的物质，不论是核苷、核苷酸或核酸在260nm处都会一个*高吸收峰。

280nm：蛋白质由于含有芳香氨基酸，因此也能吸收紫外光，通常蛋白质的吸收高峰在280nm波长处。其与260nm处的吸光度比值，经常被用于判断核酸样品的纯度。

除了这三个常见的波长外，在核酸检测过程中340nm往往会被用来检测样品缓冲液的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0，如果不是，表明溶液中有悬浮物。

图为 核酸、蛋白质吸光度谱

比值的意义：

260/230、260/280

纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5下：

A260 / A280比值应大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。

如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

较纯净的核酸A260/A230的比值一般在1.8-2.2之间。

比值降低往往是样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等。

但实际样品情况往往要相对复杂，如《分子克隆实验指南》(第三版)所述，当 0.5％BSA蛋白质污染时，A260和A280的数值都下降，其结果是260/280的比值略微下降。但同时，蛋白残留会导致A230的数值明显上升，进而显著影响260/230的比值。也就是说，如果样品的260/280比值略低于标准值，但260 /230下降明显，那么就应该考虑污染原因是蛋白残留，而不是胍盐残留。

酚的*大吸收峰在270nm。酚的残留会增加A230、A260和A280的数值，同时酚的吸收峰与核酸的吸收峰合并后，*大吸收峰会出现在270nm附近。因此当样品*大吸收峰会出现在270nm附近，且260/280=1~1.5, 260/230=1~1.5，那么污染原因就应该考虑是酚残留。

胍盐会在小于230nm处产生大的吸收峰，进而显著影响260/230比值，但胍盐残留不会影响A260、A280的数值，以及260/280的比值。也就是说，如果核酸样品的260/280符合要求，但260/230<1，那么污染原因就应该考虑是胍盐残留。

以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于核酸浓度测量的230、260、280。

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